Súprava ELISA na stanovenie protilátok proti cyklickému citrulínovanému peptidu (CCP)

Táto súprava detekuje protilátky proti cyklickému citrulínovanému peptidu (CCP) vo vzorkách ľudského séra na základe nepriamej metódy, pričom ako povlakový antigén sa používajú purifikované antigény cyklického citrulínovaného peptidu.

Testovací proces začína pridaním vzorky séra do reakčných jamiek, ktoré boli vopred potiahnuté vyššie uvedenými purifikovanými antigénmi, po čom nasleduje inkubačná doba. Počas tejto inkubácie, ak sú vo vzorke prítomné protilátky CCP, tieto špecificky rozpoznajú a viažu sa na cyklické citrulínované peptidové antigény potiahnuté na mikrojamkách, čím vytvoria stabilné komplexy antigén-protilátka. Aby sa zabezpečila presnosť nasledujúcich krokov, neviazané zložky v reakčných jamkách sa odstránia premývacím procesom, čo pomáha eliminovať potenciálnu interferenciu z iných látok v sére.

Následne sa do reakčných jamiek pridajú enzýmové konjugáty. Po druhej inkubácii sa tieto enzýmové konjugáty špecificky viažu na existujúce komplexy antigén-protilátka a vytvoria väčší imunitný komplex, ktorý obsahuje antigén, protilátku a enzýmový konjugát. Keď sa do systému zavedie roztok substrátu TMB, enzým v konjugáte katalyzuje chemickú reakciu so substrátom TMB, čo vedie k viditeľnej zmene farby. Intenzita tejto farebnej reakcie priamo súvisí s množstvom protilátok CCP prítomných v pôvodnej vzorke séra. Nakoniec sa na meranie absorbancie (hodnota A) reakčnej zmesi použije čítačka mikroplatničiek. Analýzou tejto hodnoty absorbancie je možné presne určiť hladinu protilátok CCP vo vzorke, čo poskytuje spoľahlivý základ pre relevantné klinické testovanie a diagnostiku.